噴霧干燥機一個地高辛配基
標記 !!光敏生物素（"#$%$&’$%’(）是一種光敏化合物，通過一個連接臂，一端連接生物素，另一端連接化學性質(zhì)活潑的光敏基團。在強可見光下，光敏基團與核苷酸特定部位共價結(jié)合，合成光敏生物素標記探針。 !!（三）地高辛標記物 !!地高辛（)’*$+’*,(’(，-’*）是類固醇半抗原化合物，通過一個 ..個碳原子的交聯(lián)臂與尿嘧啶核苷酸的嘧啶環(huán)上的第 /位碳相連，形成地高辛標記的尿嘧啶核苷酸。地高辛標記的效率高，一般每 01 20/個核苷酸（(%）中就帶噴霧干燥機一個地高辛配基，雜交后又有靈敏的免疫酶學檢測系統(tǒng)，靈敏度高，有取代生物素標記探針的趨勢。 !!（四）分子信標 !!分子信標（3$4,56478 &,75$(）是根據(jù)核酸堿基配對原則和熒光共振能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象設(shè)計的。分子信標長約 0/ (%，空間結(jié)構(gòu)呈莖環(huán)形，其中環(huán)序列是和靶核酸互補的探針，莖長 / 29 (%，由與靶序列無關(guān)的互補序列構(gòu)成，莖的一端連上一個熒光分子，另一端連上一個淬滅分子（ :6,(5#,8）。當無靶序列時，分子信標呈莖環(huán)結(jié)構(gòu)，熒光分子和淬滅分子非常接近，熒光分子發(fā)出的熒光被淬滅分子吸收并以熱的形式散發(fā)，檢測不到熒光信號。當有靶序列存在時，分子信標的環(huán)序列和靶序列特異的結(jié)合，形成的雙鏈比莖環(huán)結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定，熒光分子和淬滅分子分開，熒光分子發(fā)出的熒光不被淬滅分子吸收，則可檢測到熒光。二、分子雜交的方法 !!分子雜交分為固相雜交、液相雜交和固相液相雜交。
固相液相雜交是把欲檢測的核酸樣本或探針先結(jié)合到固相載體上，再與液體中的探針或核酸樣品進行雜交反應(yīng)，漂洗去除未反應(yīng)的探針或核酸樣品，經(jīng)檢測雜交信號，判斷雜交結(jié)果。 !!（一）斑點雜交 !!斑點雜交（)$% &4$% #;&8’)’<7%’$(）是將>?或 ->?變性后直接點樣在硝酸纖維素膜上，探針放在雜交液內(nèi)進行雜交。方法簡便、快速、靈敏，用于特定基因的定性分析。 ! ! ->?點陣（->? 7887;）是將相關(guān)的探針按順序點在硝酸纖維素膜上，待檢樣品放在雜交液內(nèi)，檢查樣品中的核酸能和哪一個探針雜交。 !!基因芯片（*,(, 5#’"@）是將探針點在硅片上，待測樣品放在雜交液內(nèi)進行雜交，借助計算機判斷樣品中的核酸能和哪一個探針雜交。 ->?點陣和基因芯片點在固相上的是探針的序列，沒有進行標記。待測核酸樣品在雜交前進行標記。 !!斑點雜交、 ->?點陣、基因芯片主要是確定待檢樣品中有沒有所要的核酸。 !!（二）原位雜交 !!原位雜交
（’( @’%6 #;&8’)’<7%’$(）是用核酸探針與細胞和組織切片中的核酸進行雜交并對其進行檢測>?分子經(jīng)限制酶切，在瓊脂糖凝膠上電泳使 ->?片段依據(jù)相對分子質(zhì)量大小分開，再將電泳結(jié)果從凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上，經(jīng)固定和變性后，在膜上與探針進行雜交，確定電泳條帶中哪一條是所要的 ->?。開始將瓊脂糖上的 ->?條帶轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，采用的是用吸墨汁紙吸水（&4$%%’(*）的方法（見圖 .9 9?）。英國愛丁堡大學的 B)C’( A$6%#,8(博士 第十七章 /基因技術(shù)!"!建立了此方法， !"#$%&’(印跡雜交由此得名。現(xiàn)在將 )*+轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上多采用轉(zhuǎn)移電泳的方法（見圖 ,--.）。圖 ,--/ !"#$%&’(印跡雜交 //（0）*"’$%&’(印跡雜交（ ("’$%&’( 12"$$3(4）/ *"’$%&’(印跡雜交是經(jīng)典的 5*+分析法。操作方法和 !"#$%&’(印跡雜交方法基本相似，是將 5*+經(jīng)電泳分開后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上進行雜交。 //（6）7&8$&’(印跡雜交（9&8$&’( 12"$$3(4）/ 7&8$&’(印跡雜交是將蛋白質(zhì)經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，檢測哪一種蛋白質(zhì)能和抗體反應(yīng)，也叫免疫印跡技術(shù)。第三節(jié) /聚合酶鏈反應(yīng)
當前實驗室噴霧干燥機網(wǎng)站位置:
